只要你的程序中Main入口是如下的,则你的程序在运行时,在一个时刻只能有一个程序实例,比如Winamp就是这种,当它在运行时,再又击这个程序,是不会再运行一个实例的.

代码很简单

[STAThread]

         static void Main(string[] args)

         {

              bool isExist;

 System.Threading.Mutex mutex=new System.Threading.Mutex(true,"myApp",out isExist); 

//这里的myApp是程序的标识,建议换成你的程序的物理路径,这样的话如果在一个操作系统中这个标志不会和其它程序冲突     

             if(isExist)Environment.Exit(1);//实例已经存在,退出程序

}