<%@ Application Language="C#" %>

<script runat="server">

    private System.IO.StreamWriter streamwrite;
    private System.IO.StreamReader streamread;
    private System.IO.FileStream file;
    
    
    void Application_Start(object sender, EventArgs e) 
    {
        // 在应用程序启动时运行的代码



        Application["CurrentGuests"] = 0;
        file = System.IO.File.Open(Server.MapPath("counts.text"), System.IO.FileMode.OpenOrCreate);
        streamread = new System.IO.StreamReader(file);
        Application["AllGuests"] = Convert.ToInt32(streamread.ReadLine());
        streamread.Close();
        

    }
    
    void Application_End(object sender, EventArgs e) 
    {
        //  在应用程序关闭时运行的代码

    }
        
    void Application_Error(object sender, EventArgs e) 
    { 
        // 在出现未处理的错误时运行的代码

    }

    void Session_Start(object sender, EventArgs e) 
    {
        // 在新会话启动时运行的代码

        Application.Lock();
        Application["CurrentGuests"] = (int)Application["CurrentGuests"] + 1;
        Application["AllGuests"] = (int)Application["AllGuests"] + 1;//访问网站的总用户数

        file = System.IO.File.Open(Server.MapPath("counts.text"), System.IO.FileMode.OpenOrCreate, System.IO.FileAccess.ReadWrite);
        streamwrite = new System.IO.StreamWriter(file);
        streamwrite.WriteLine(Application["AllGuests"].ToString());


        streamwrite.Close();
        Application.UnLock();
        
        

    }

    void Session_End(object sender, EventArgs e) 
    {
        // 在会话结束时运行的代码。 
        // 注意: 只有在 Web.config 文件中的 sessionstate 模式设置为
        // InProc 时，才会引发 Session_End 事件。如果会话模式设置为 StateServer 
        // 或 SQLServer，则不会引发该事件。

        Application.Lock();
        Application["CurrentGuests"] = (int)Application["CurrentGuests"] - 1;
        Application.UnLock();

    }
       
</script>

------解决方案--------------------

楼主参考下
http://www.cnblogs.com/Fskjb/archive/2010/04/26/1721624.html